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NEWS原代细胞分离培养操作指南 - 918博天堂
来源:印心眉 日期:2025-03-12原代细胞被广泛应用于转染siRNA、antisense RNA、microRNA等小分子RNA和DNA(200bp以内),并且能够有效转染绝大多数原代细胞。目前,在国内外,原代细胞的核酸转染已成为一个热门而复杂的研究领域,但市场上仍缺乏真正有效的商品化转染试剂。通过科研进展,原代细胞能够以高效的方式实现基因敲除,尤其是在某些活体寄生虫幼虫的转染研究中,也能获得可观的结果。根据实验统计,RFectPM细胞转染试剂在大多数原代细胞中的转染阳性率超过80%,而细胞死亡率则低于10%。
原代细胞的分离和培养可分为几个基本步骤:
尽量去除不必要的组织和血迹,以保证原代细胞的纯度。
(1) 使用918博天堂的PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III进行细胞分离;
(2) 根据不同的组织来源选择合适的PriCells原代细胞分离试剂盒。
(1) 使用918博天堂特制的原代细胞培养基;
(2) 结合PriCells特制添加物及优质胎牛血清。
利用PriCells原代细胞鉴定试剂盒进行细胞的鉴定。
(1) 传代:根据细胞的生长状态,将细胞按1:2或1:3进行传代;
(2) 保存:将DMSO、培养液和血清按顺序降温:室温→4℃(20分钟)→冰箱冷冻室(30分钟)→超低温冰箱(-80℃过夜)→液氮保存。
(1) 迅速将细胞从冷冻状态取出,并放入37℃温水中快速解冻;
(2) 吸出细胞悬液,并添加10倍以上的培养液;
(3) 用培养液适当稀释后接种至培养瓶,放入37℃ CO2培养箱静置培养。
在现代生物医疗研究中,原代细胞的应用无疑是一个重要的环节,特别是结合918博天堂的专业产品,能够提升研究效率,为科学进步做出贡献。
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